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Candidate SPR小分子靶点验证技术介绍

一、技术简介

Candidate SPR小分子靶点验证技术是一项基于表面等离子共振（SPR, Surface Plasmon Resonance）技术检测芯片表面液体的折射率变化（与结合分子的质量成正比）， 几乎可以检测所有的生物分子，如蛋白质、多肽、DNA、多糖、脂质体、小分子化合物。广泛应用于分子相互作用研究相关的各个领域，从基础科学研究、高通量药物筛选、药物分子结构优化到生产工艺开发和质量控制。

Candidate SPR小分子靶点验证技术是基于表面等离子共振（SPR）技术，通过检测芯片表面液体的折射率变化（与结合分子的质量成正比）来研究生物分子间的相互作用。该技术能检测多种生物分子，如蛋白质、多糖、脂质体、多肽、DNA等，并广泛应用于基础科学研究、药物筛选、生产工艺开发和质量控制等领域。

二、技术原理及功能

•  基于表面等离子共振原理（药典收录）

•  无需添加任何标签

•   实时检测（ Real-time）

•  快速（min）、全自动、高通量

•      全面的互作信息：  特异性、亲和力、  动力学

三、提供全面的分子间相互作用信息

四、核心组件

传感芯片的选择

多种不同的芯片类型

•    CM5, CM4, CM3芯片：蛋白、肽段、小分子等

•    PEG芯片：聚乙二醇 (PEG) 基质的传感芯片，可替代葡聚糖基质表面

•    CM7：小分子化合物研究

•    SA芯片/NA芯片：生物素标记的分子，如核酸、糖类等

•    Biotin CAP芯片：可逆性生物素捕获芯片

•    NTA芯片：  His重组蛋白

•    HPA芯片：实现膜系统相关的互作分析

•    C1芯片：研究细胞、病毒等大颗粒分子

•    Au裸金芯片：客户定制表面（材料、高分子等）

•    ProteinA ， G ， L芯片，  PrismA芯片

•   维护芯片

五、样品要求：

蛋白固定芯片

1.蛋白纯度大于90%；

2.提供蛋白的等电点和氨基酸序列信息；

3.蛋白缓冲液缓冲液中不能带有活性氨基的分子，如Tris，叠氮钠等；

分析物（流动相）

1 .纯度大于90%；

2.小分子提供1-5mg；

3.提供准确分子量和浓度以及溶剂成分；

4 .溶剂最好不能含有有机化合物，5% DMSO以内 ；

5.不能含有海藻糖，BSA，蔗糖等保护剂

六、实验流程

预富集 (Pre-concentration/pH Scouting)

预富集的目的：在化学偶联过程，通过静电作用吸附并提高芯片表面附近的配体浓度， 从而提

高偶联的效率和减少配体消耗

PH太低时，葡聚糖不带电，无法富集

蛋白带正电，葡聚糖带负电，通过静电吸附可以吸附配体

蛋白葡聚糖带相同负电，无法富集

样品进样 (Injection)

 分析物 (Analyte)进样后，以恒定的流速和浓度流过芯片表面

•   样品中的待分析物与固定在芯片表面上的配体发生结合，芯片表面物质的质量发生改变，仪 器记录下对应的响应值 (response) 的改变

•   进样结束后，切换缓冲液流过芯片表面，分析物由配体上自发解离的进程由响应值实时监控

动力学分析的数据拟合